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如何提高熒光定量PCR儀的使用壽命
點(diǎn)擊次數(shù):736 更新時間:2023-04-20
  熒光定量PCR儀是一種基于熒光信號測定PCR反應(yīng)過程中DNA擴(kuò)增產(chǎn)物數(shù)量的儀器。它通過特定的熒光染料,將PCR擴(kuò)增的DNA產(chǎn)物與熒光染料結(jié)合,測定熒光信號的增加幅度,從而定量PCR反應(yīng)中DNA的含量和質(zhì)量,并判斷PCR反應(yīng)的成敗。
  熒光定量PCR儀是利用PCR反應(yīng)過程中DNA產(chǎn)物擴(kuò)增的特性,通過定量測定熒光信號的大小來測算PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的含量。在PCR反應(yīng)的過程中,熒光探針被加入到PCR反應(yīng)混合物中,不斷與目標(biāo)序列結(jié)合產(chǎn)生熒光信號。PCR反應(yīng)結(jié)束時,熒光信號與DNA擴(kuò)增產(chǎn)物數(shù)量成正比,進(jìn)而可以通過熒光信號的大小來判斷PCR反應(yīng)的成敗。
  熒光定量PCR儀在工作過程中可能會出現(xiàn)一些故障。例如,當(dāng)熒光染料過量或缺乏時,熒光信號的量化讀數(shù)將無法準(zhǔn)確,導(dǎo)致樣本的質(zhì)量和數(shù)量誤判。此時,可以加入合適濃度的熒光染料加以矯正;當(dāng)光源強(qiáng)度不夠時,熒光信號可能會消失或變得微弱,此時可以更換熒光染料,或檢查光源是否正常工作;另外,PCR反應(yīng)產(chǎn)物含量很低,可能會導(dǎo)致熒光強(qiáng)度的信號噪聲很大,此時可以增加擴(kuò)增的循環(huán)數(shù),或者添加信號增強(qiáng)劑等。
  熒光定量PCR儀具有檢測DNA的含量和質(zhì)量、PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的濃度、提高PCR反應(yīng)的效率等等方面的應(yīng)用價值。在運(yùn)行熒光定量PCR儀時,也需要嚴(yán)格遵守操作規(guī)范和養(yǎng)護(hù)維護(hù),以確保儀器和數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確和可靠。