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MC3T3-E1 Subclone 14 小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆

細(xì)胞具體情況介紹：

細(xì)胞名稱                       MC3T3-E1 Subclone 14 小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆

來源                              ATCC 細(xì)胞庫

種屬                              小鼠

組織                              腦

生長(zhǎng)特性                       貼壁

建議使用培養(yǎng)基

成瘤情況                       未貼壁

龍躍細(xì)胞庫簡(jiǎn)介：

我公司自有高品質(zhì)進(jìn)口來源細(xì)胞庫， 所有細(xì)胞來源為進(jìn)口母細(xì)胞， 經(jīng)過永生化處理制成傳代細(xì)胞株， 保證為國(guó)內(nèi)高品質(zhì)傳代細(xì)胞株。

另外我們有專門的工程師負(fù)責(zé)售后維護(hù)工作， 保證您購買細(xì)胞沒有后顧之憂，  如果對(duì)細(xì)胞品質(zhì)不滿意可以無條件退款或免費(fèi)重新發(fā)貨，直到滿意為止。

 細(xì)胞處理方法

以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度，細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo)，請(qǐng)及時(shí)電話或郵件聯(lián)系。

一．貼壁細(xì)胞

1. 客戶接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
3. 顯微鏡觀察細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞融匯80%左右（可以傳代的情況下），細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
4. 嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
5. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
6. 用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
7. 1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO₂  培養(yǎng)。

二．懸浮細(xì)胞

1. 接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。

2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。

3. 嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）。

5. 1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO₂  培養(yǎng)

維修 PCR/酶標(biāo)儀/所有實(shí)驗(yàn)室儀器

我公司維修站目前國(guó)內(nèi)有上海和北京兩個(gè)站點(diǎn)  （ 北京和上海可以派專人上門檢測(cè)儀器并運(yùn)往維修站， 也可以發(fā)快遞我公司 ）， 免費(fèi)檢查，  找到問題后報(bào)價(jià)維修， 如果報(bào)價(jià)后您覺得價(jià)格高的話可以不修（我們負(fù)責(zé)把機(jī)器原樣寄回）

實(shí)驗(yàn)室儀器維修， 包括PCR， 酶標(biāo)儀， 離心機(jī)，分析儀器，天平，水分計(jì)等

從事維修工作的工程師有長(zhǎng)達(dá)20年的工作經(jīng)驗(yàn)，  可勝任幾乎所有常規(guī)實(shí)驗(yàn)室儀器的維修及校準(zhǔn)等工作， 大熒光定量PCR， DNA測(cè)序儀，小到水分計(jì)都可以維修

細(xì)胞培養(yǎng)小課堂----細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)環(huán)境

細(xì)胞培養(yǎng)（cell culture）是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營(yíng)養(yǎng)條件等），使之生存、生長(zhǎng)、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對(duì)于整個(gè)生物工程技術(shù)，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說，細(xì)胞培養(yǎng)都是一個(gè)*的過程，細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)?？寺?。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡(jiǎn)單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞，這是克隆技術(shù)*的環(huán)節(jié)，而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中重要和常用技術(shù)，通過細(xì)胞培養(yǎng)既可以獲得大量細(xì)胞，又可以借此研究細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞的合成代謝、細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖等。

1．無菌環(huán)境

無毒和無菌是體外培養(yǎng)細(xì)胞的要條件。細(xì)胞在活體內(nèi)，解毒系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)可抵抗微生物或其他有害物質(zhì)的入侵，但細(xì)胞在體外培養(yǎng)的過程中，缺乏機(jī)體免疫系統(tǒng)的保護(hù)而喪失對(duì)微生物的防御能力和對(duì)有害物質(zhì)的解毒能力。為保證細(xì)胞能在體外環(huán)境中生長(zhǎng)繁殖，必須要確保無菌工作區(qū)域、良好的個(gè)人衛(wèi)生、無菌試劑和培養(yǎng)基以及無菌操作。

常見的微生物污染有支原體、細(xì)菌、真菌。支原體無致死毒性，可與細(xì)胞長(zhǎng)期共存，對(duì)細(xì)胞有潛在影響，但體積小，不易鑒別，可借助于地衣紅或Hoechst33342染色來進(jìn)行檢測(cè)。細(xì)菌增殖快，在短時(shí)間內(nèi)即可大量擴(kuò)增，并產(chǎn)生毒素殺死細(xì)胞。真菌的種類繁多，肉眼可見，漂浮于培養(yǎng)液面上，可呈絲狀、管狀或樹枝狀等。

2.合適的溫度

一般哺乳類與禽類細(xì)胞在體外培養(yǎng)的適宜溫度是37～38℃，不適宜的環(huán)境溫度會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)。細(xì)胞對(duì)低溫的耐受能力要強(qiáng)于對(duì)高溫的耐受能力，在低溫下，細(xì)胞的代謝活力及核分裂能力降低。若溫度不低于0℃，雖然細(xì)胞代謝受到影響，但無損傷作用；25～35℃時(shí)，細(xì)胞以緩慢的速度生長(zhǎng)；但若被置于40℃數(shù)小時(shí)，則不僅不利于細(xì)胞生存、生長(zhǎng)，甚可導(dǎo)致其死亡。